Taipei Medical University Institutional Repository:Item 987654321/6738
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    Title: 靜脈麻醉藥物2,6-雙異丙烷酚對肝細胞細胞支架的調控作用
    Authors: 王嫻琪
    Contributors: 藥理學研究所
    Keywords: 2
    6-雙異丙烷酚
    肝細胞
    細胞支架
    Propofol
    HepG2
    Cytoskeleton
    Date: 2004
    Issue Date: 2009-09-11 17:32:53 (UTC+8)
    Abstract: 2,6-雙異丙烷酚(2,6-diisopropylphenol)為一靜脈麻醉藥物,廣泛使用於麻醉之誘導與持續。肝臟是2,6-雙異丙烷酚的主要代謝器官,肝細胞對2,6-雙異丙烷酚的代謝扮演重要角色。細胞支架(cytoskeleton)參與細胞形態(morphology)之維持,以及細胞運動(migration)和分化(differentiation)作用。當細胞支架受到破壞時,會影響細胞的正常功能。本研究主要在探討2,6-雙異丙烷酚對肝細胞細胞支架的調控作用,以及當肝細胞細胞支架受到2,6-雙異丙烷酚調控後,對肝細胞代謝酵素可能造成的影響。
    本研究以肝臟HepG2細胞為研究模式。當以2,6-雙異丙烷酚 100 μM)處理HepG2細胞1、6和24小時,不會影響細胞之型態和存活率(viability)。但當2,6-雙異丙烷酚處理的濃度到達300 μM時,則會明顯造成細胞的死亡。以螢光顯微鏡法分析肝細胞F-actin細胞支架發現,以臨床濃度(50 μM)的2,6-雙異丙烷酚處理HepG2細胞1小時,並不會影響F-actin細胞支架的聚集。但在處理6和24小時後,2,6-雙異丙烷酚則會明顯抑制F-actin細胞支架的聚集。進一步以共軛焦顯微鏡分析2,6-雙異丙烷酚對肝細胞F-actin的影響發現,以50 μM 2,6-雙異丙烷酚處理肝細胞1小時,並不會影響F-actin細胞支架的聚集。但在處理6和24小時後,HepG2細胞 F-actin細胞支架的聚集明顯被2,6-雙異丙烷酚所抑制。以RT-PCR方法分析α-actin mRNA發現,50 μM 2,6-雙異丙烷酚不會影響α-actin mRNA的表現。另一方面,以螢光顯微鏡法分析肝細胞microtubule細胞支架發現,以50 μM的2,6-雙異丙烷酚處理HepG2細胞1小時,並不會影響microtubule細胞支架的聚集。但在處理6和24小時後,2,6-雙異丙烷酚會明顯抑制microtubule細胞支架的聚集。進一步以共顯微鏡分析2,6-雙異丙烷酚對肝細胞microtubule的影響發現,50 μM 2,6-雙異丙烷酚處理1小時後,不會影響microtubule細胞支架的聚集。但在處理6和24小時後,HepG2 細胞microtubule細胞支架的聚集明顯被2,6-雙異丙烷酚所抑制。
    進一步分析當細胞支架受到2,6-雙異丙烷酚干擾後,其對肝臟代謝酵素CYP3A4 mRNA的影響。首先以RT-PCR方法分析CYP3A4 mRNA的表現,50 μM 2,6-雙異丙烷酚會抑制CYP3A4 mRNA的表現,且此一抑制作用具有時間效應。進一步探討2,6-雙異丙烷酚抑制CYP3A4 mRNA的機制發現,葡萄糖皮質荷爾蒙受體(glucocorticoid receptor)mRNA和pregnane X 受體mRNA的表現亦會被2,6-雙異丙烷酚所抑制。
    由本研究結果可知,2,6-雙異丙烷酚在臨床濃度(50 μM)下,能抑制肝細胞F-actin及microtubule細胞支架的聚集。而在肝細胞細胞支架受到干擾後,2,6-雙異丙烷酚會進一步抑制CYP3A4 mRNA的表現,且此一抑制機制是透過降低葡萄糖皮質荷爾蒙受體和pregnane X 受體 mRNA的表現。所以,2,6-雙異丙烷酚在臨床濃度下,會影響肝細胞細胞支架及CYP3A4代謝酵素的表現。
    Data Type: thesis
    Appears in Collections:[School of Pharmacy] Dissertation/Thesis

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